如何涂过滤器?
发布时间:2021-04-15 13:52

1.对于ChemoTx®系统,将蛋白质溶液用移液器吸到孔位上,并确保每个环内的整个位点都被覆盖。对于101系列或111系列,通常需要8-10µL,对于106系列或116系列,通常需要20-25µL。为了获得更一致的涂层厚度,请根据需要小心除去流体。在使用或涂布第二面之前,请让涂层干燥。警告:请勿覆盖疏水环。这将损害其性能。请勿刺破过滤器。

2.用纤连蛋白包被:

  1. 在陪替氏培养皿中,用40µL纤连蛋白(2mg / mL)和10mL PBS混合的无PVP聚碳酸酯膜。
  2. 冷藏过夜。
  3. 在PBS上漂浮膜以去除多余的纤连蛋白。
  4. 挂起晾干后再使用。

如果您的膜不是不含PVP的,则应在乙酸中预先清洗以除去大部分PVP,并使蛋白质更好地粘附在膜上。

类似的步骤适用于胶原蛋白,明胶等。注意:不建议对ChemoTx®系统过滤器使用此技术。

3.用Matrigel涂层:

  • 将不含PVP的膜放在平坦的表面上,例如一块玻璃上。
  • 使用单条胶带将长边缘的整个长度粘上,该胶带在潮湿时不会松动或膨胀。“隐形”办公胶带通常效果很好。不要用胶带覆盖将覆盖孔并阻止迁移的膜的任何部分。
  • 在膜中心附近放置少量Matrigel。
  • 在胶带上铺设玻璃搅拌棒或类似的光滑物体,然后将Matrigel摊开,直到获得光滑,均匀的涂层,厚度大约是胶带的厚度。
  • 小心地撕下胶带,或沿膜的边缘切开胶带。不要撕破膜。

根据需要修改这些步骤,以适合带框滤镜或直径13mm的滤镜。如果您的膜是经过PVP处理的,则用乙酸清洗膜将去除大部分PVP,因此涂层的附着力更好。注意:不建议对ChemoTx®系统过滤器使用此技术。

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